物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些定波長的光能量,相應地發生了分子振動能躍遷和電子能躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同。因此,每種物質就有其有的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些征波長處的吸光度的低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
又因為許多物質在紫外-可見光區有征吸收峰,所以可用紫外分光光度法對這些物質分別行測定(定量分析和定性分析)。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。
朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律,俗稱光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據和基礎。當入射光波長定時,溶液的吸光度A是吸光物質的濃度C及吸收介質厚度l(吸收光程)的函數。